為什么同樣的蛋白使用EZBiolab 預(yù)制膠得到蛋白分子量和使用Tris Glycine膠得出的結(jié)果可能會不同?
首先采用SDS Page測定蛋白分子量是一個比較粗獷的方法,本身就會有誤差。
其次, 不同成分的PAGE膠和電泳緩沖液中相同蛋白會有遷移率會有差別。 pH值不同, 蛋白和SDS結(jié)合也有差別。造成蛋白在凝膠中是遷移速度不一致。這是正常現(xiàn)象,也為廣大實驗員所認知。并不能據(jù)此就認為某種體系的凝膠比另外體系凝膠的測量蛋白分子量更為精確。目前常用的凝膠體系有Tris Glycine體系、Bis-Tris體系、MOPS體系 和Hepes體系。 每個體系都有自己的特點。
最后, 如果要測定蛋白質(zhì)的精確分子量, 要多種方法結(jié)合, 特別是采用Mass